ELISA试剂盒有很多种种类，人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、羊、鸡、鸭、植物等ELISA试剂盒。那么现在给大家推荐的就是鸡elia试剂盒，了解下鸡ELISA试剂盒实际操作过程中需要注意的事项。植物ELISA试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中植物吲哚乙酸（IAA）的含量。
那么你知道植物ELIA的原理么？植物ELISA试剂盒采用竞争法测定植物吲哚乙酸（IAA）水平。用植物吲哚乙酸（IAA）抗原包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入标本及标准品，并加入HRP 标记的IAA抗体，标本及标准品中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。反复洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。
一、样本收集、处理及保存
1. 细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2. 细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3. 血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5. 体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6. 组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
二、操作步骤
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。
2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 100ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 100ul的蒸馏水；其余微孔中加入100ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。
7. 显色：各孔加入显色剂 A 液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
三、注意事项：
1. 实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样时，要控制加样速度，避免第壹孔与醉后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性。
3. 孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。
5. 建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。
6. 建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。
四、安全性
1．避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
以上就是鸡ELISA试剂盒的操作内容和注意事项了，看到这里想必大家会更感兴趣了吧，想了解更多内容即可登录上海原鑫生物科技有限公司www.bio-shyx.com寻求ElLSA试剂盒操作的研究人员进行咨询。
