PCR基因扩增仪温度验证系统
随着生命科学技术的发展,基因扩增仪成了分子物领域重要分析设备。基因扩增仪也称聚合酶链式反应仪(PolymeraseChain Reaction Instruments,以下简称 PCR仪),是一种使DNA聚合酶在指定的温度场条件下发生基因复制的仪器,。 PCR仪是通过热循环的温度变化控制实现DNA的变性和复制,温度控制水平决定了基因扩增仪的质量,对PCR仪进行有效的温度校准具有重要的意义。
pcr仪温度校准装置、基因扩增仪(PCR仪)测温系统校准装置
基因扩增仪(PCR仪)测温系统校准规范
一、 引言
PCR是聚合酶链反应(polymerase chainreaction)的简称,是在短时间内体外大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。自动完成聚合酶链反应,提供DNA扩增的温度条件而设计的仪器称为PCR仪。
PCR仪主要用于DNA片段的放大,可将DNA分子或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,在这过程中主要是3个特征温度循环:
1. 高温变性:把样品加热至90~95℃让DNA模板变性变成单链。
2. 低温退火:让样品的温度迅速下降至50~65℃,引物就可以结合到模板上去。
3. 适温延伸:让样品的温度上升至70~75℃,DNA聚合酶就可以从引物开始用底物复制出新链。
在PCR反应过程中对温度控制的要求很高,良好的温度控制是PCR仪质量好坏的关键。
二、PCR基因扩增仪校准的现状
PCR仪的控温精度、升降温速率以及温场的均匀性等直接影响DNA片段扩增的结果。PCR仪经使用后,其温度传感器的计量特性会发生变化,作为计量设备一般须经定期校准后方能继续使用。
几乎进行聚合酶链反应试验的实验室(如基因判别、亲子鉴定、DNA个体识别)都会使用多台扩增仪以满足实验需求。实验室内的基因扩增仪都是常开常用,使用频率高,很难保证其性能指标符合实验要求。各实验室对PCR仪的质量控制还停留在自检自校和依赖于厂商的售后支持。
产品用途
PCR是聚合酶链反应(polymerasechain reaction)的简称,是在短时间内体外大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。自动完成聚合酶链反应,提供DNA 扩增的温度条件而设计的仪器称为PCR仪。
PCR仪主要用于DNA片段的放大,可将DNA分子或某DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,在这过程中主要是3个特征温度循环:
1. 高温变性:把样品加热至90~95℃让DNA模板变性变成单链。
2. 低温退火:让样品的温度迅速下降至50~65℃,引物就可以结合到模板上去。
3. 适温延伸:让样品的温度上升至70~75℃,DNA聚合酶就可以从引物开始用底物复制出新链。
在PCR反应过程中对温度控制的要求很高,良好的温度控制是PCR仪质量好坏的关键。
产品简介
、 PCR仪温度校准的项目及必要性
个稳定的温度循环是成功实现PCR所必需的。其中温度控制的动、稳态特性是影响PCR扩增结果正确与否的zui重要因素之,这包括温度准确性、升降温速度、温场均匀性、zui大超调温度。
()、温度准确性
温度准确性是PCR仪zui重要的性能指标,如温度准确性低可直接造成非特异性扩增,甚至是错误的扩增结果,造成假阳性和假阴性。
市场上各家厂商考核基因扩增仪(PCR仪)性能的主要指标,般厂家的企业指标为±0.5℃,些性能较好的产品可以实现的温度准确度为±0.3℃。故需对PCR仪控温准确度进行测试。
校准实验平均温度的计算公式为:I—参加检测的温度探头序号;n—参加检测的温度探头的数量
(二)、温场均匀性
由于PCR仪加热器加热不均匀,导致PCR仪模块上各孔存在定温差。造成试验结果偏差。般PCR仪边缘点的温度低于中间区域,均匀性为PCR仪重要的性能指标。般厂家的企业指标规定均匀性为±0.5℃,些性能较好的产品可以实现的温度均匀度为±0.3℃。
校准实验时,通过选取孔板中16个特殊反应位置来测量温度,并得出孔板的温度均匀性。均匀性为各个探头在刻zui大温度与zui小温度的差值。均匀度计算公式为:tmax-tmin (tmax =zui大温度;tmin =zui小温度)
(三)、升降温速率
PCR扩增产物数量的多少决定了PCR的效率。为了在短时间内获得尽可能多的产物,需要仪器在升降温段具有按照预设升降温速率快速升温和降温的能力(zui大升温速率达15~20℃)。个完整的PCR过程,是由若干个升温→恒温→降温循环构成的。因为“变性”,“退火”和“延伸”3个阶段是必须要保证的。只有使升降温的过程尽可能地迅速,才能缩短每个PCR循环以及整个PCR过程所需时间。般厂家的企业指标规定升温速率为±3℃/sec。
仪器校准实验时,升温速率为温度从40℃到90℃的时间;降温速率为温度从70℃到35℃的时间。
(四)、zui大超调温度
当温度从定点温度调节到另定点温度,就会产生温度的超调。超调温度过大同样会对试验产生影响,校准实验时,需要计算zui大超调温度和平均超调温度。
产品选型
二、解决方案
根据基因扩增仪(PCR仪)测温系统校准规范的要求,我们公司推出了pcr仪温度校准装置、基因扩增仪(PCR仪)测温系统校准装置来校准pcr仪。
具体方案精密测温仪+恒温槽+标准热敏电阻
具体方案 精密测温仪+恒温槽+标准热敏电阻
高精度多路测温仪,内置ITS-90温标,可连接标准温度计配置为标准测温仪。1586A具有二线、三线、四线制测量方式,完全符合《JJG229-2010工业铂、铜热电阻检定规程》满足AA级、A级铂热电阻检定要求,热电偶、热敏电阻测量支持内部、外部及固定补偿。
1. 多路检测,高速采集。系统配备高精度测温仪1611A,多通路温度检测,采集速度可达10ms/通道,超高速数据采集提高校准效率
2. 测温探头高精度高贴合性。探头采用镀金工艺,响应速度快,长期稳定性佳,符合ITS-90,均可溯源,满足规程JJF1527-2015校准规范的0.1℃精度要求;测温探头外型贴合PCR反应孔,尺寸误差小于1mm,保证测量数据准确度
3. 软排线出线方式灵活,适用多种PCR仪;在工艺上也进行了升级,宽度更窄,更不易折损,延长了使用寿命
4. 有强大的数据采集与分析软件支持。实时记录数据,自动生成校准报告,和趋势绘图,满足校准规范,支持对各温度指标的自动计算
5. 双供电方式提升使用便捷度。测温仪支持充电和插电两种供电方式,现场使用更便捷
基因分型系统、全自动多功能基因检测系统、核酸提取仪、全自动核酸浓度分析工作站
我们探头扳支持客户定制,满足不同孔数需求