【评价原理】
斑马鱼的骨骼看似与人类差别明显,实际上它的生长发育过程和调控机制与哺乳动物高度相似。斑马鱼骨骼发育迅速,适合快速建立骨骼疾病模型。在大量摄入糖皮质激素(以泼尼松为例)后,斑马鱼会出现继发性骨质疏松。
骨密度几乎由骨骼中钙含量来反映,应用特异性地结合钙的荧光染料染色(呈绿色),用其荧光强度可反映骨密度。斑马鱼骨骼染色后经荧光显微镜采集到的荧光强度能够客观反映骨密度。
【实验方案】
我们将测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用强健骨骼产品组。其中正常对照组未加入泼尼松,模型对照组与服用强健骨骼产品组加入了等量的泼尼松(泼尼松通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用强健骨骼产品组在加入泼尼松的加入碳酸钙、维生素D3之类的强健骨骼产品。
服用一段时间强健骨骼产品后,我们对斑马鱼整体做钙黄绿素染色,观察脊椎骨荧光强度。
【结果展示】
图1. 斑马鱼脊椎骨表型图。(黄色虚线区域为脊椎骨)
可以看到,服用强健骨骼产品的脊椎骨骨密度与正常对照组比较相似,没有明显的骨质疏松。
【评价结论】
1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用强健骨骼产品组的骨密度与未经泼尼松处理的正常对照组相似,并未出现模型对照组的骨质疏松的情况。
2.本实验证实了碳酸钙、维生素D3具有显著的强健骨骼功效。